生物活性
產品描述 ZM-447439 是Aurora 選擇性ATP競爭性抑制劑,作用于Aurora A激酶和Aurora B 激酶時,IC50 分別為110 nM 和 130 nM。
靶點 Aurora A Aurora B 激酶
IC50 110 nM 130 nM [1]
體外研究 體外, ZM-447439 選擇性抑制重組人類Aurora A和B,IC50分別為110和130 nM,而抑制其他不同結構類型蛋白激酶，包括有絲分裂激酶CDK1和PLK1時，IC50>10 μM。 [1] Aurora 激酶抑制劑, ZM-447439 抑制BON, QGP-1和MIP-101三種細胞系生長，連續處理72小時，IC50分別為3 μM , 0.9 μM 和3 μM，這種作用存在時間和劑量依賴性。此外, ZM-447439通過促進DNA分裂和 caspase 3 和7激活,有效誘導細胞凋亡，且使GEP-NET細胞在G0/G1期和G2/M期停頓。[2] 在小鼠胚胎中, ZM-447439 抑制Aurora 激酶,通過在每個胚胎周期使用不同干擾，調節G2到中期的組蛋白H3 serine 10 (H3S10Ph)而使前兩次分裂發生異常。[3] 最近研究顯示ZM-447439作用于宮頸癌SiHa細胞，抑制生長和凋亡，且增強對Cisplatin的化學敏感性。[4]
推薦的實驗操作
激酶實驗:  
體外激酶實驗 使用桿狀病毒表達體系，表達重組Aurora A和B作為氨基末端His6標記融合蛋白。使用Ni-NTA瓊脂糖，通過親和層析純化Aurora A，使用CM Sepharose Fast Flow，通過離子交換層析純化Aurora B。1 ng 純化的重組酶加到反應中，反應中含 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, 12.5 mM KCl, 2.5 mM NaF, 0.6 mM DTT, 6.25 mM MnCl2, 10 μM 肽底物, 10 μM ATP（Aurora A），5 μM ATP（Aurora B）, 和0.2 μCi γ[33P]ATP (比活≥2,500 Ci/mmol), 然后在室溫下溫育60分鐘。加入20% 磷酸反應終止，使用P30硝化纖維過濾器獲得產物， 使用Beta 板TM計數器測定33P攝入率。
細胞試驗: [2]
細胞系 BON, QGP-1和MIP-101
濃度 0到5 μM
處理時間 72小時
方法 通過結晶紫染色測評細胞數。細胞接種在96孔板上，與1% 戊二醇混合。細胞用0.1% 結晶紫染色。用水沖洗未結合的染料。用0.2% Triton X-100溶解結合的結晶紫。使用ELISA讀數器在570 nm處分析線性增加的細胞數。
化學數據
穩定性 2年 -20°C粉狀
2周4°C溶于DMSO
6月-80°C溶于DMSO